Comparison of Ovine Spermatozoal Morphological Features After Staining of Fixation and Assessment of Morphological Abnormalities in Dead/Live Spermatozoa

Abstract

Bu aşamada (i) koç spermatozoitlerinin morfolojik ?özellikleri ?üzerine iki ayrı boyama yönteminin ve bir fiksatif solusyonun etkisinin karşılaştırılması ve (ii) Eosin-Nigrosin boyama yöntemi kullanılarak ?ölü/canlı spermatozoada morfolojik ?özelliklerin araştırılması amaçlanmıştır. Taze spermatozoitlerin morfolojik ?özellikleri Eosin-Nigrosin, sadece Nigrosin ile boyandıktan veya Hancock’un tamponlu formol-tuz solusyonu ile fikse edildikten sonra Phase Contrast mikroskobu kullanılarak incelendi. 6 adet Kıvırcık koç’un, 42 adet taze, pooling yapılmış sperma ?örnekleri kullanıldı. Hancock’un solusyonu ile fiksasyondan sonra akrozomal ve toplam morfolojik anormaliteler sırasıyla ortalama %3,97 ve %14,78 iken, aynı değerler Eosin-Nigrosin boyama yönteminde %10,07 ve %18,54 ve Nigrosin boyama yönteminde ise %7,97 ve %18,45 olarak saptandı (P<0.05). Eosin-Nigrosin ile boyamadan sonra ?ölü? spermatozoitlerde aynı morfolojik anormaliteler sırasıyla %15,38 ve %24,42 olarak bulunurken, canlı spermatozoitlerde ise sırasıyla %4,21 ve %10,80 olarak kaydedildi (P<0.05). Sonuç olarak, koç spermatozoitlerinin boyama işlemlerinin akrozomal ve toplam morfolojik ?özellikler ?üzerine zararlı etkisi olduğu, dolayısıyla ?ölü? spermatozoitlerde aynı morfolojik ?özelliklere ait anormalitelerin arttığı kanısına varılmıştır. Anahtar Sözcükler: Koç, spermatozoa, fiksasyon, boyama