Koyun embriyolarının in vitro üretilmesi üzerine olgunlaşma ve fertilizasyon medyumlarına yapılan katkılar ve koyun ovidukt epitel hücreleri ile ko-kültürün etkileri.

Abstract

Koyun embriyolanın in vitro üretilmesi üzerine olgunlaşma ve fertilizasyon medyumlarına yapılan ko-kültürün etkilerinin incelndiği bu çalışmada mezbahada kesilen koyunların ovaryumlarından elde edilen primer oositler (n=454) kullanıldı. OOsitler 4 gruba ayrılarak farklı katkıların bulunduğu TCM-199 medyumunda 26 saat olgunştırıldı:

Grup 1 (SH): %20 oranında koyun serumu, 10 µg/mL LH ve 1 µg/mL estratiol 17ß ilaveli TCM-199

Grup 2 (S): %20 oranında koyun serumu ilaveli TCM-199

Grup 3 (H): 10 µg/mL LH ve 1 µg/mL estratiol 17 ß ilaveli TCM-199

Grup 4 (M): Hormon ve serum ilavesi olmayan TCM- 199

Olgunlaşmayı takiben oositler tekrar 3'er altı gruba ayrılarak %2 (D), %5 (O) ve %10 (Y) koyun östrus serumu ilaveli SOF medyumu içirisine alındı ve üzerlerine elektro-ejakülatör yardımıyla alınmış ve yıkanmış taze koç sperması ilave edilerek 18 saat in vitro fertilize edildi. FErtilizsyonu takiben oositler kendi içlerinde terar 2'şer altı gruba [Grup 1 (KK) koyun ovidukt epitel hücreleri ile ko-kültür; Grup 2 (K): Koyun ovidukt epitle hücreleri kullanılmayan kültür grubu] ayrıldı ve 7 gün kültüre edildi. Bu sürenin sonunda embriyoların gelişmeleri değerlendirildi.

Çaşmada en yüksek cleavage (yarıklanma) ve morula oranları SH+Y+KK grubunda (sırasıyla &62,5 ve %43,8), en düşük oranlar ise (sırasıyla %8,7 ve %4,3) M+D+K grubunda elde edildi. Bu sonuçlara göre koyun oositlerinin in vitro olgunlaştırılmasında %20 oranında koyun serumu ve hormonların, fertilizasyon medyumunda %10 oranında ostrustaki koyun serumunun kullanılması ve fertilizasyon sonrası koyun ovidukt epitel hücreleri ile ko-kültür uygulamasının uygulamasının yarıklanma ve morula oranlarını iyileştirdiği söylenebilir.