TYPING OF EXTENDED-SPECTRUM BETA-LACTAMASES IN ESCHERICHIA COLI AND KLEBSIELLA SPP. STRAINS AND ANALYSIS OF PLASMID PROFILES

Abstract

Bu çalışmada, İstanbul Tıp Fakültesi Hastanesinin farklı ünitelerinde (yoğun bakım, hematoloji, onkoloji,

yenidoğan, transplantasyon, çocuk cerrahisi) yatan hastaların çeşitli klinik örneklerinden (idrar, kan,

trakeal aspirat, apse, boğaz, dren/kateter ucu, plevra/periton sıvısı, beyin omurilik sıvısı, göz) izole edilen

genişlemiş spektrumlu beta-laktamaz (GSBL) üreten 12 Escherichia coli ve 32 Klebsiella spp. (28 K.pneumoniae,

4 K.oxytoca) suşlarındaki beta-laktamaz enzimlerinin araştırılması ve tiplendirilmesi amaçlanmıştır.

NCCLS (CLSI) önerilerine göre disk difüzyon yöntemi ile yapılan antimikrobiyal duyarlılık testlerinde

imipeneme ve meropeneme dirençli suşa rastlanmamıştır. Agar dilüsyon yöntemiyle hem E.coli, hem de

Klebsiella suşlarında sefotaksim için MİK50 ve MİK90 sırasıyla 16 μg/ml ve 64 μg/ml olarak bulunmuştur.

GSBL varlığı, disk difüzyon testinde klavulanik asit ve 3. kuşak sefalosporinler arasındaki sinerji ile gösterilmiştir.

Suşların tümü, çift disk sinerji ve E-test ile GSBL fenotipi göstermiştir. Yapılan izoelektrik fokuslama

sonuçlarına göre, suşlarda, pI: 5.4-9.0 arasında 1-4 adet beta-laktamaz bulunmuştur. TEM, SHV ve

CTX-M genlerine özgül primerler kullanılarak yapılan polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) sonuçlarına göre

K.pneumoniae ve E.coli suşlarında TEM, SHV ve CTX-M beta-laktamazların oranı sırasıyla %64.3,

%92.9, %64.3 ve %66.7, %25, %83.3 olarak bulunmuştur. ERIC-2 primeri kullanılarak yapılan RAPD

(Randomly Amplified Polymorphic DNA)-PCR ile suşların 170-1500 bp arasında bantlara sahip olduğu

görülmüş ve K.pneumoniae’da 10, K.oxytoca’da 3 ve E.coli’de 6 grup belirlenmiştir. Konjugasyon ile 44

suşun 31 (%70.4)’inde antibiyotik direnci alıcı suşa aktarılabilmiştir. Plazmid profil analizine göre transkonjugatların

20 (%64.5)’sinin tek bir plazmide (> 48 kb), 11 (%35.5)’inin ise birden fazla plazmide (10-

100 kb) sahip olduğu saptanmıştır. Bu sonuçlar, hastanemizde izole edilen E.coli ve Klebsiella suşları arasında

CTX-M beta-laktamazın, yüksek oranda olduğunu ve hızla yayıldığını göstermektedir.