LPS ile İndüklenen THP-1 Hücre Soyunda Kolşisinin Matriks Metalloproteinaz Aktivitelerine Etkisi

Abstract

nflamasyonda sitokin ailesinin üyesi olan interlökinlerin önemli bir rolü bulunmaktadır. İnflamasyonla ilişkili olduğu bilinen enterobakterial LPS’nin (lipopolisakkarid) IL-1β, TNF- α, IL-6 gibi öncü-inflamatuar sitokinlerin salınımını TLR (toll benzeri reseptör) ve NF-?β (nüklear çekirdek faktör) aracılığı ile düzenler. IL-1β’nın, ailevi akdeniz ateşi (FMF), tip 2 diyabet, romatoid arthrit, multipl skleroz ve birçok otoinflamatuar hastalıkta arttığı bilinmektedir. Matriks metalloproteinazlar (MMP) fizyolojik ve patolojik doku yıkımında görevli hücre dışı proteazlardır. Kanser gelişiminde rol aldıkları bilinmektedir. Ayrıca matriks yıkımına neden olan proteazlar olarak birçok kanser tipinde metastazdan sorumludurlar. MMP’lerinde bazı sitokinlerin aktivasyonunu sağladığı bilinmektedir. Kolşisin, “Güz Çiğdemi” (Colchicum autumnale) çiçeğinden elde edilen anti inflamatuar bir ilaçtır. Kolşisin aynı zamanda monosit ve nötrofil kemotaksisini azaltır. Lökositlerde c-AMP düzeyini arttırarak lizozomal degranülasyonu inhibe eder. FMF tedavisinde atakları önlemede kullanılmakta ve amiloidoz riskinden de hastayı kurtarmaktadır. Mikrotubül depolimerleşmesine neden olduğu bilinmekle birlikte etki mekanizması henüz tam olarak aydınlatılmamıştır. Bu çalışmada 50 ng/ml LPS ile 1 saat süre ile indüklenmiş THP-1 (insan monositer lösemi) hücrelerinde artan derişimlerde kolşisinin (100, 500, 1000 ng/ml) MMP’ler üzerine etkisi 12 saat süre sonunda değerlendirildi. Salınan sitokin miktarları SDS-PAGE sonrası Western Blot yöntemi kullanılarak İmaje J ile analiz edildi. Elde edilen veriler istatistiksel olarak SPSS Windows 11 ile değerlendirildi. LPS varlığında THP-1 hücrelerinde MMP aktivitelerinin arttığı izlendi. Farklı derişimlerde kolşisine yanıtın ise doza bağlı olarak değiştiği ve yüksek dozda sitotoksik etkiye yol açtığı görüldü.